二手液相色谱仪的输液系统与分离系统解析

二手液相色谱仪的输液系统

二手液相色谱的输液系统由高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分构成。高压泵通常工作在1.47至4.4×10^6 Pa的压力范围内，具备可调且稳定的流速。当高压流动相通过色谱柱时，可以有效降低样品在柱中扩散的效应，并加快其移动速度，这对提升分辨率、样品回收率及保持样品的生物活性具有重要意义。此外，流动相贮存器和梯度仪能够根据固定相和样品的特性进行调整，包括改变洗脱液的极性、离子强度、pH值，或引入竞争性抑制剂和变性剂等。这使得即便是仅有微小结构差异的物质（如同分异构体）也能实现高效分离。

二手液相色谱仪的分离系统

分离系统由色谱柱、连接管以及恒温器等组成。色谱柱的长度一般在10到50厘米之间（若需使用两根柱，可通过连接管相连），内径在2到5毫米，采用优质不锈钢、厚壁玻璃或钛合金等材料制成。色谱柱内部填充有直径为5到10微米的固定相，其构成由基质与固定液组合而成。基质主要由高机械强度的树脂或硅胶制成，具备惰性（通过去除硅胶表面的硅酸基因实现）、多孔性（孔径可达1000Å），以及较大的比表面积等特点。通过机械涂覆或化学偶联不同的基因（如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或不同长度的烷基链等），固定相能够对不同结构的物质提供优良选择性。例如，在多孔硅胶表面偶联豌豆凝集素（PSA），便能够有效分离成纤维细胞中某种特定的糖蛋白。

此外，固定相的微小粒径使得柱床易于达到均匀和致密的状态，从而降低了涡流扩散效应。由于基质粒径较小且微孔较浅，样品在微孔中的传质距离短，这对缩小谱带宽度并提高分辨率有显著帮助。根据柱效理论，基质粒径越小，塔板理论数N也越大，进一步证明了粒径对分辨率提升的积极作用。最后，高效液相色谱的恒温器能够将温度从室温调至60℃，通过改善传质速率和缩短分析时间，增强了色谱柱的整体效率。