二手液相色谱柱作为二手液相色谱仪中不可或缺的组成部分,对于准确数据的获取至关重要。
以下是体现二手液相色谱柱价值的关键参数:
1. 硅胶基质:硅胶基质具有高纯度、低成本、高强度和易于化学修饰的特点,但其使用的pH范围受限。大部分硅胶基质填料在pH2-8范围内稳定,而经过特殊修饰的硅胶键合相可扩展至pH1.5-10。
2. 孔容和机械强度:孔容指单位颗粒的空隙体积大小,代表填料的机械强度。填料的孔容大则相对机械强度略弱。孔容小于1.5mL/g的填料主要用于HPLC分离,而孔容大于1.5mL/g的填料适用于尺寸排阻色谱和低压色谱。
3. 孔径和比表面积:HPLC吸附介质为多孔颗粒,其中大多数反应表面位于孔内。分子需要进入孔内才能被吸附和分离。孔径和比表面积相辅相成,孔径小则比表面积大,反之亦然。较大比表面积有助于提高样品与键合相的反应、分离效果和样品保存,适用于复杂成分的分离。
4. 含碳量:二手液相色谱柱的含碳量指硅胶表面键合相中碳的比例,直接影响柱容量、分辨率和分析时间。高含碳量适用于要求高分离度的复杂样品,低含碳量适用于快速分析简单样品或需要高含水活动相条件的样品。一般C18填料的含碳量在0.07-0.19之间。
5. 颗粒外形:现代HPLC填料大多为球形颗粒,提供较低的柱压、较高的柱效和稳定性,以及较长的柱寿命。不规则颗粒具有较大的比表面积和相对较低的价格,适用于使用高粘度活动相的情况。
6. 颗粒粒径:颗粒粒径越小,柱效和分离度越高,但也会导致较高的柱压。选择1.5-3μm填料可解决一些复杂样品的分析需求,而1.5μm填料适合高要求的分析,而10μm或更大颗粒粒径的填料用于半制备或制备柱。