在之前的一篇关于色谱柱使用和维护的文章中,我们详细介绍了许多色谱柱的注意事项。今天我们将重点分享保护色谱柱延长使用寿命的三个关键步骤,帮助您更有效地延长色谱柱的使用寿命。
让您的色谱柱使用更经久?
虽然无法实现色谱柱的永久耐用,但可以延长其使用寿命。
有时候您会发现实验室经费大部分都花在不断购买柱子上。为什么色谱柱的寿命不能更长一些呢?实际上,在合理维护下,色谱柱的成本在液相分析支出中只占很小一部分。举例来说,标准反相柱的成本在3405-4087元之间,如果每根柱子能进样500-1000次,那么每次进样的成本在3.4-6.8元之间。
尽管实验室和方法不同,完成一次常规分析的总费用为340元是合理的,这也符合第三方实验室对类似分析的定价。
因此,柱子的成本在总分析成本中仅占1-2%,我们努力将柱子使用寿命延长一倍,即使单根柱子的成本仍然很高,实际上这并不能显著降低整体分析成本。个人观点是,如果一根柱子能进样500次,那已经相当经济划算了。
合理期望值是什么?
首先,让我们看看其他色谱学家的经验。根据Ron Majors在2011年的用户调查数据,可知接近四分之三的用户进样寿命达到500次以上,其中近一半达到至少1000次的进样寿命。这一结果令人惊讶,因为它包含了对各种类型色谱柱寿命的调查,不仅仅是液相中使用最频繁的标准反相柱,相对于其他类型的色谱柱,它在使用中更为耐用。
为了观察随时间变化的情况,我比较了1997年至2011年四次调查结果,可以看到几个明显的趋势。
请注意灰色柱,表示进样次数小于1000次前柱子损坏的百分比,从1997年的76%下降到2011年的53%;与之形成鲜明对比的是代表进样次数达到1000次以上的黄色柱急剧增加。如前所述,我将进样500次视为柱子使用寿命的一个平衡点,可以发现进样次数未达到500次的用户数量明显减少,从1997年近一半下降至2011年的四分之一。
最后,有关那些仅能进行100次或更少进样次数的用户数量,即那些经历可怕情况的用户,比例基本上未改变,大约在10%左右。
找出这种变化的原因仅限于猜测,但我愿意进行推测。我认为柱子寿命延长的主要原因是用户接受了更好的培训,对样品前处理和柱子的物理保护更加重视。
接下来将重点讨论保护色谱柱寿命的三个关键步骤:
第一:不要未处理样品就进行进样。进行样品前处理过程,清除样品中可能影响色谱柱的化学污染物和微粒。使用固相萃取、液液萃取等技术清除化学污染物是重要的。样品前处理步骤越多,色谱柱的使用寿命就会更长。
第二:使用在线过滤器。在线过滤器是LC或UHPLC中成本最低的额外装置,提供最大的回报。在线过滤器是一个简单的改装管配件,内含一个特定孔径的筛板,安装在自动进样器和色谱柱之间。
第三:使用保护柱。保护柱位于色谱柱上游,长度约为10-20mm,包含与色谱柱相同的填料。保护柱具有双重功能,可拦截可能堵塞色谱柱的颗粒,并捕获可能附着在柱填料上的物质,延长色谱柱寿命。
虽然无法使色谱柱的寿命无限延长,但简单的方法可以延长色谱柱这一昂贵部件的使用寿命。正确的样品前处理、在线过滤器和保护柱的使用将有助于提高色谱柱的使用效率和寿命。希望以上信息对您有所帮助。