二手液相色谱仪操作与维护的22个核心要点

二手液相色谱仪，作为化学、生物学及医药等领域的关键分析设备，其应用广泛且至关重要。该仪器基于分子在移动相与固定相间的亲和力差异，实现对复杂混合物的分离、鉴定及定量分析。

01 色谱柱的适配与装配细节

依据目标分析物的化学性质，精心挑选适宜的色谱柱。例如，对于极性较强的化合物，宜选用亲水性更强的固定相（如经过特定改性的硅胶）。在装配时，需细致检查色谱柱的进出口端，确保无颗粒物堵塞。利用专用扳手紧固接头，防止因过度拧紧而导致的损坏。同时，应验证所有O型圈及接头的密封性，以防溶剂泄漏。

02 溶剂脱气技术

为确保溶剂中的气泡得到有效去除，可采用在线脱气模块，或在分析前将溶剂置于超声波水浴中处理至少15分钟。定期检查脱气设备的运行状态，确保其正常工作。因为脱气不足的溶剂会在泵和检测器中形成气泡，进而对分析结果的稳定性和准确性产生不利影响。

03 样品污染预防措施

为防止样品中的颗粒物堵塞色谱柱，应使用滤膜对样品进行过滤。滤膜孔径的选择需根据样品性质而定，通常为0.45μm或更小。每次分析结束后，应彻底清洗样品瓶及注射器，使用色谱纯溶剂冲洗至少三次，以避免残留物引起的交叉污染。

04 流动相pH值控制策略

使用高精度pH计精确测量并调整流动相的pH值，特别是在使用缓冲溶液时。记录pH值的变化，并定期校验pH计的准确性。对于对pH值敏感的分析方法，可考虑采用二氧化碳控制器进行精确控制，以避免手动添加酸碱带来的波动。

05 温度控制精细化管理

利用可编程的温度控制器，精确设定并监控色谱柱及样品室的温度。确保温度均匀性，特别是在进行温度梯度分析时。定期检查温度传感器及加热器的性能，必要时进行维护或更换，以确保温度控制的准确性。

06 界面连接与管道检查

定期进行压力测试及泄漏测试，全面检查所有高压管道及连接。使用专用工具及染料测试液，检测可能存在的微小泄漏。及时更换磨损或老化的管道，特别是频繁接触强溶剂的部分，以确保系统的密封性和稳定性。

07 色谱图标定流程

采用多个浓度的标准溶液制备校准曲线，确保覆盖整个浓度范围。定期进行标定验证，对比新旧标定数据，以评估检测灵敏度和定量准确性的变化。

08 溶剂质量控制与过滤

仅使用符合色谱分析要求的高纯度溶剂，并定期检查溶剂是否变质（如异味、颜色变化等）。使用0.2μm或更细的滤膜对溶剂进行彻底过滤，以去除可见及微观颗粒，防止色谱柱堵塞。

09 溶剂兼容性评估

对新引入的溶剂进行兼容性测试，评估其与系统各部件的化学稳定性。建立溶剂使用记录，包括品牌、型号及使用日期，以便追踪及替换。这有助于确保溶剂与系统部件的相容性，防止化学反应导致设备损坏。

10 紫外检测器光路维护

定期检查紫外检测器的光路部件（如灯泡、光电二极管等），并按时更换灯泡以确保较好的性能。使用专用清洁剂清洁光学元件，避免使用可能划伤或腐蚀光学表面的材料。这有助于保持检测器的灵敏度和准确性。

11 梯度洗脱优化策略

根据目标分析物的极性及分子量，优化梯度洗脱条件。在方法开发阶段，采用较小的梯度变化测试分离效果，并逐步调整直至获得理想的分离效果。这有助于提高分析的分辨率和准确性。

12 流动相精确配制

使用高精度天平和量具精确测量并混合流动相组分。对于复杂的溶剂系统，可采用自动混合系统以确保比例准确无误。这有助于确保流动相组成的稳定性和一致性。

13 气泡消除技术

为确保所有流动相和样品在注入前充分脱气，可采用在线脱气器或通过超声波处理减少溶剂中的空气含量。在液相泵和检测器前安装空气阱，以拦截可能进入系统的气泡，避免对泵和检测器造成不良影响。

14 静电与振动防护

在液相色谱仪周围配置静电消除设备，特别是在干燥或使用易挥发溶剂的环境中。确保仪器放置于稳固的台面上，远离可能产生振动的设备（如大型冷冻机、离心机等），以减少振动对分析的影响。这有助于保持仪器的稳定性和准确性。

15 样品进样量控制

根据检测器的灵敏度和色谱柱的承载能力，合理调整样品的进样量。过多的样品可能导致色谱柱过载，影响分离效果和峰形。使用自动进样器时，需定期校准以确保每次注入量的一致性。

16 进样器清洁与保养

定期对进样器的针及阀门进行清洗，去除残留的样品或溶剂，防止交叉污染和堵塞。检查并更换磨损或损坏的密封件及O型圈，确保系统密封性能良好。这有助于延长进样器的使用寿命和保持分析的准确性。

17 柱后处理

分析完成后，使用适当的洗脱液清洗色谱柱，去除可能残留在柱内的高保留组分。对于生物大分子等敏感样品，应采用温和的洗脱条件以避免损伤色谱柱。这有助于保持色谱柱的分离性能和延长使用寿命。

18 温度精确控制

采用柱箱控温系统，精确调节并维持色谱柱的操作温度，特别是在进行温度敏感的分析时。定期监测并校验温度传感器，确保读数准确无误。这有助于确保分析的稳定性和准确性。

19 流速精确控制

精确控制流动相的流速对于分离效率及分析时间至关重要。采用高精度泵确保流速的一致性。定期校验流速计及泵的性能，以保持流速的准确和稳定。这有助于提高分析的分辨率和重复性。

20 数据处理软件应用

熟悉并正确设置数据处理软件，确保数据采集及处理符合分析要求。定期更新软件和固件，利用软件提供的工具和算法优化分析过程及数据质量。这有助于提高分析效率和准确性。

21 压力监控系统

持续监控系统的压力变化，异常压力可能是堵塞、泄漏或泵故障的早期预警。安装压力传感器并定期校验其精度，及时发现并解决问题。这有助于确保系统的稳定性和安全性。

22 检测器选择与维护

根据分析目标选择合适的检测器（如UV、荧光、质谱等）。定期维护检测器，清洁检测窗口，检查并调整光源和传感器，确保检测器性能的准确性。定期对检测器进行校准，以确保其响应符合预期标准。这有助于保持检测器的灵敏度和准确性，提高分析的可靠性。