在二手高效液相色谱(HPLC)分析中,检测器作为系统的“眼睛”,扮演着至关重要的角色。
一、紫外吸收检测器:经典而高效
紫外吸收检测器(UV)是HPLC中应用最为广泛的检测器之一,其工作原理基于朗伯-比尔定律。该检测器具有灵敏度高、线性范围宽、对流速和温度变化不敏感等显著优点,尤其适用于梯度洗脱分离。然而,其应用受限于被检测样品组分需具有紫外-可见光吸收,且流动相在检测波长处无吸收。因此,在选择检测波长时,需综合考虑待测物质的分子结构、流动相组成以及共存组分的干扰等因素。
二、光电二极管阵列检测器:多维信息的获取
光电二极管阵列检测器(PDAD)是一种新型的光吸收检测器,能够同时检测光栅分离的所有波长的光信号,形成三维色谱光谱图。这种检测器不仅提供了丰富的光谱信息,还可进行色谱峰光谱相似性比较、峰纯度检测及样品检索等,为定性、定量分析提供了更为全面和准确的数据支持。
三、荧光检测器:高灵敏度与选择性
荧光检测器(FD)以其高灵敏度和选择性而著称,特别适用于痕量分析。其原理基于化合物受紫外光激发后发射出荧光,通过检测荧光强度来测定样品含量。虽然荧光检测器的线性范围相对较窄,但采用激光诱导荧光技术可极大提高信噪比,进一步拓宽了其应用范围。
四、示差折光检测器:通用性检测的选择
示差折光检测器(RID)是一种通用的浓度检测器,对所有溶质均有响应。其工作原理基于连续测定样品流路和参比流路之间折射率的变化来测定样品含量。这种检测器特别适用于高分子化合物、糖类、脂肪烷烃等无选择性检测器响应的组分。然而,其灵敏度相对较低,且对流动相的折光指数变化敏感。
五、电化学检测器:电活性物质的专属检测
电化学检测器(ECD)是一种选择性检测器,能够检测具有电活性的化合物。根据检测原理的不同,可分为电导检测器、安培检测器、介电常数检测器和电位测定检测器等。这类检测器具有灵敏度高、选择性好、线性范围宽等优点,尤其适用于离子色谱和痕量分析。
六、化学发光检测器:新型快速检测技术的崛起
化学发光检测器(CD)是一种快速、灵敏的新型检测器,其原理基于某些物质在常温下进行化学反应时发射出光子。这种检测器无需光源和复杂的光学系统,具有设备简单、价格低廉、线性范围宽等优点。然而,其应用受限于化学反应的种类和条件,以及化学发光试剂的选择和稳定性。
七、蒸发光散射检测器:通用型质量检测的新星
蒸发光散射检测器(ELSD)是一种新型通用型质量检测器,特别适用于检测挥发性低于流动相的组分。其工作原理基于样品颗粒的光散射现象,具有通用性好、响应一致、与梯度洗脱相容等优点。然而,其灵敏度相对较低,且流动相的选择受限。在应用过程中,需综合考虑操作模式、流动相组成及流速、漂移管温度以及载气流速等因素对检测性能的影响。
HPLC中常用的检测器各具特色,应根据待测样品的性质、分析目的以及实验条件等因素综合考虑选择合适的检测器。同时,深入了解各种检测器的工作原理和性能特点,对于提高分析结果的准确性和可靠性具有重要意义。